免疫胶体金的制备原理（上）

胶体金是氯金酸(HAuCl₄)在氧化剂如白磷、抗坏血酸、枸橼酸钠、鞣酸等作用下，金正离子复原后汇聚而成一定大小的金颗粒物，它由一个基础的能量源（11个金分子所形成的二十面体）和包围着在外的双正离子层组成（里层为空气负离子层AuCl₂^－，表层是带正电的H^＋）。因为静电引力，金颗粒物中间相互排斥而飘浮成为一种相对稳定的胶体状态，产生带负电荷的疏水胶溶液，故名胶体金。胶体金厂家讲述胶体金在碱性条件下带负电，能与蛋白质分子的正电官能团产生稳固的融合，由于这种融合是静电感应融合，所以不影响蛋白质的特性。除开与蛋白质融合之外，它还可以与很多其他分子融合，如SPA、PHA、ConA等。依据胶体金的一些物理性状，如高电荷密度、颗粒物尺寸、样子及颜色反应，再加上结合物的免疫和生长习性，因此使胶体金普遍地用于医学免疫学、病理学、病理学和分子遗传学等领域。

胶体金标识，实质上是蛋白质等高分子材料被吸咐到胶体金颗粒物表层的抱被过程。用以胶体金标识的蛋白一定要通过预处理，其目的是为了：（1）除去高浓度的盐份，高浓度的盐份通常影响蛋白与胶体金的吸咐融合，或造成胶体金颗粒的凝结，这一步通常选用较低浓度的缓冲溶液中进行。（2）使蛋白分子结构尽可能分散为单个，干冻蛋白或浓度较高的蛋白溶液中蛋白分子结构通常凝结为多聚体生物大分子，可同时与多个胶体金颗粒融合，影响标识的精确度和定量分析。（3）使蛋白具备适度的含量。蛋白含量太小（30kD），所形成的蛋白分子通常不稳，可短时间失去活性。而含量太大时，被认为影响探针的敏感度，尤其是已经知道蛋白的结构与活性中心的情形下，除去对活力影响的构造部分是提升标识敏感度，增加探针使用寿命（避免凝结）的有力方法。把含量太小的蛋白与其它蛋白（如血清蛋白等）融合后，胶体金厂家能配制出可靠性更好的探针。