胶体金厂家教您如何测定直径用事先处理好的覆有Formvar膜的镍网浸入胶体金溶液内,取出放到空气中干燥或37℃烤箱烤干。随后在透射电镜下观察,关键观察金颗粒的尺寸,符合不符合所必须的颗粒直径,金颗粒是否匀称一致,有无椭圆型及七边形金颗粒存有。理想的金颗粒尺寸基本相同,匀称一致,无椭圆型及七边形的金颗粒存在,还能够拍片放大后测量金颗粒直径的大小,然后用统计学解决,测算胶体金颗粒的平均直径及标准差,前者体现颗粒的大小,后者表明颗粒是否匀称一致,但这类方式实施起来非常艰难。 在实际工作之中,胶体金厂家一般以吸收峰(λ)、峰宽(Δλ)、吸收峰处的吸光度值(λOD)三个指标来点评胶体金溶液: 吸收峰(λ):制取的胶体金颗粒尺寸,能够建立该目的粒径对应的吸收峰(如应用500-600之间全波长扫描),此指标用于评价制取的胶体金溶液是否符合预期规定。事实上,在现实工作中即便每一个标准均可以做到充分均匀和稳定,胶体金厂家每次制取的胶体金颗粒开展扫描时,获得的较大吸收峰会有细微的偏移,这个偏位就代表了与目的粒径的差别,因而创建的这个指标是一个范畴,自然这个范畴是越小越好(例如在±1nm以内)。 峰宽(Δλ):所需要的胶体金溶液,理想中的颗粒粒径是尺寸均一的,但实际上不能做到,一定是处在某个可接受范畴里的粒径,因此能够创建能接受的粒径遍布范畴,自然这个范畴越小越好,说明所制备的胶体金溶液粒径匀称。 吸光度值(ODλ峰):所制备的胶体金溶液在较大吸收峰处的吸光度值代表的是粒径的浓度,吸光度值越多,目的粒径浓度越高,相反则越低。该浓度也影响到胶体金内的稳定性,及其后续标识蛋白时的效率。 |